LAB 04 : 재조합DNA의 제조 (제한효소 및 ligase효소reaction(반응))
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작성일 20-04-13 18:38
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이 경우 어떻게 하면 외래DNA를 쉽게 삽입시킬 수 있을 지 意見을 제시해 보라.
설명
4R-1. Cloning vector로서 pBR322와 pUC18 DNA를 이용하였을 경우 재조합 DNA의 선별방법을 설명하라.
4R-1. Cloning vector로서 pBR322와 pUC18 DNA를 이용하였을 경우 재조합 DNA의 선별방법을 설명(explanation)하라.
※재조합 DNA를 선별방법이 필요한 이유
재조합DNA의 제조, 제한효소 및 ligase효소반응, cloning vector, pBR322, pUC18 DNA, enzyme, self-ligation
4R-1. Cloning vector로서 pBR322와 pUC18 DNA를 이용하였을 경우 재조합 DNA의 선별방법을 설명하라. 4R-2. Single Restriction Enzyme으로 절단된 vector의 경우 self-ligation 으로 인하여 외래 DNA가 삽입되는 효율이 매우 낮다. 우리가 벡터를 잘라서 잘라진 공간에 유전자를 넣는데 우리가 원하는 재조합 DNA 분자가 들어가기도 하고 원하는 유전자가 아닌 다른 유전자들도 들어갈 수 있다. 이 경우 어떻게 하면 외래DNA를 쉽게 삽입시킬 수 있을 지 의견을 제시해 보라.
LAB 04 : 재조합DNA의 제조 (제한효소 및 ligase효소reaction(반응))
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: 클로닝의 주요목적 중에서정제기능이 있다.
다. 그래서 클로닝 한다는 것은 우리가 원하는 DNA만 골라내는 작업이라고 할 수 있다. 즉, 잘못된 재조합 DNA 분자도 있고 DNA 조각이 들어가지 않고 그냥 self-ligation된 DNA도 있다.
4R-2. Single Restriction Enzyme으로 절단된 vector의 경우 self-ligation 으로 인하여 외래 DNA가 삽입되는 효율이 매우 낮다.
